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细胞背景与来源

做肠癌或者肠道内分泌方向的朋友，大概率见过 NCI-H716 这个名字。它是从人结直肠腺癌里来的细胞株，最大的特点是自带内分泌属性——这在结直肠细胞系里不算常见，所以研究胃肠道激素、GLP-1 分泌的课题常拿它当模型。

NCI-H716 是人结直肠腺癌细胞，1984 年从一位 33 岁白人男性结肠腺癌患者的腹水转移灶里分离出来，取样前患者还用过 5-氟尿嘧啶治疗。细胞里含多巴脱羧酶，胞质里有致密核心颗粒——这种颗粒正是内分泌细胞的标志。它不表达 TAG-72、CA19-9，也不产 CEA。结直肠癌研究、3D 培养、肠内分泌/GLP-1 相关研究都能用上它。

来源：人，结肠腺癌腹水转移灶。形态上属于半贴壁细胞，主要呈聚团悬浮生长，少量分散悬浮，还有一部分会贴瓶底。细胞团个头不算小，要用枪头轻吹把大团打散成小团，免得团块中间的细胞被“饿死”。

应用场景与研究价值

• 肿瘤学：结直肠癌的发生、耐药、药物筛选（尤其 5-FU 相关）。
• 内分泌/代谢：作为肠内分泌细胞模型，研究 GLP-1、胃肠激素的分泌调控，是糖尿病药物研发里的常用工具。
• 3D/类器官方向：本身有成团生长特性，适合做 3D 或球体培养。

培养特性与注意事项

培养基：RPMI 1640 + 10% FBS + 1% 双抗。环境 37℃、5% CO2、饱和湿度。营养消耗快，培养基容易变黄，1-2 天换一次液比较稳。

传代：离心法（900-1000 rpm、3 min 收集）或直接分瓶法，推荐 1:2。吹打要轻、离心转速别太高，别把细胞打散成单个。

换液：状态好就离心换液；状态差、团块小的时候别频繁离心，改用半换液法，竖瓶增加局部密度，再补 5% FBS（终浓度到 15%）让它缓过来。

冻存：92% FBS + 8% DMSO（或 92% 完全培养基 + 8% DMSO），密度约 300 万/mL/管，程序降温盒 -80℃ 过夜后转液氮。复苏：37℃ 水浴 2 min 内融化，离心去上清后接种。

生物安全：BSL-1；人源细胞，操作按 BSL-2 的个人防护习惯来更稳妥。注意：细胞碎片多是正常现象，密度够高时低速离心去一部分即可，别频繁离心。

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