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DSI543Ra01子宫内膜异位症(EM)大鼠模型

一．模型简介：

子宫内膜异位症（endometriosis, EMs）是妇科临床最常见的良性疾病之一，指具有生长功能的子宫内膜组织（腺体和间质）出现在子宫腔被覆内膜及宫体肌层以外的部位。该病在育龄期女性中的发病率较高，患者常表现为慢性盆腔疼痛、痛经及不孕等症状，生活质量严重受损。尽管Sampson提出的经血逆流种植学说被广泛接受，但该病的病因学与发病机制至今尚未完全阐明，加之临床人体研究存在诸多伦理与技术限制，建立稳定、可靠的动物模型成为推动EMs研究的关键基础。

大鼠因其成本较低、繁殖力强、饲养方便、对激素干预敏感等优势，已成为EMs实验研究中最常用的模式动物之一。目前，EMs大鼠模型主要通过自体子宫组织移植法构建：将大鼠自体子宫内膜组织片段移植至腹膜、腹壁内侧或肠系膜等部位，术后4周左右即可形成典型的异位病灶。该模型能够较好地模拟人类EMs的病理特征——异位病灶呈囊泡状，与周围组织形成不同程度的粘连，镜下可见内膜细胞、间质细胞及腺体结构；在分子水平上，异位病灶中VEGF、COX-2、IL-6等促血管生成与促炎因子表达显著升高，细胞因子表达谱与人类EMs高度一致。

凭借上述与人类疾病的高度相似性，EMs大鼠模型已被广泛应用于疾病机制探索、药物疗效评价以及新型治疗策略的临床前验证等领域，是EMs基础与转化研究中不可替代的实验工具。

• 材料：

1.货号：DSI543Ra01

2.实验动物：SPF级SD大鼠，雌性，周龄为6w~8w，体重为220~250g。

三．模型制作方法：

EMs大鼠模型主要通过自体子宫组织移植法构建，具体步骤如下：

1. 麻醉与备皮：将大鼠充分麻醉后，于腹部备皮并常规消毒，沿下腹正中线做一长约1.5~2 cm的纵向切口，逐层进入腹腔。
   2.子宫组织获取与处理：找到一侧子宫角并小心分离周围系膜，于子宫角远端约1~2 cm处剪取一段子宫组织，断端以缝线结扎或缝合处理。将剪下的子宫角置于盛有无菌生理盐水的弯盘中，反复漂洗去除血迹，进一步剔除残留的子宫系膜，然后将子宫角剪成约2 mm × 2 mm的均匀组织碎片，悬浮于生理盐水中备用。
   3.组织移植：将制备好的组织碎片移植至腹膜腔内特定部位，常用移植位点包括腹壁内侧（血管丰富区域）、子宫系膜、子宫旁韧带、肠系膜以及卵巢周围或卵巢脂肪垫等。移植时以无损伤缝合线将组织块固定，并确保子宫内膜面朝向腹腔，以利于异位病灶存活与生长。
   4.关腹与术后护理：以生理盐水冲洗腹腔后逐层缝合肌肉与皮肤，将大鼠放回饲养笼中，注意保温直至其苏醒。

四．模型评估：

EMs大鼠模型的鉴定是一个多维度、分阶段的综合评估过程，主要包括以下几个核心方法：

• 宏观与大体观察

模型建立后最初步、最直观的评估手段。术后4周左右行二次开腹探查，直接观察移植物的存活、生长及与周围组织的关系；观测异位病灶是否形成典型的囊泡状结构，并测量其体积与大小，同时评估与周围组织的粘连程度。在部分疼痛研究中，还可通过Von-Frey法检测机械性痛阈、腹部舔舐实验评估自发性疼痛、面部表情评分（RGS）等行为学指标间接反映模型成功与否。

• 组织病理学检查

从细胞层面进行“金标准”鉴定。苏木精-伊红（HE）染色后光镜下观察，成功的EMs模型应能见到典型的子宫内膜腺体和间质细胞；与正常组织相比，模型组通常表现为上皮细胞层变薄、腺体数量减少并呈扩张状，伴大量炎性细胞浸润。根据需要，还可采用Masson三色染色观察胶原纤维沉积，或PAS染色观察糖原等特定物质。

• 分子生物学检测

通过检测特异性分子标志物，在蛋白和基因水平对模型进行精确定量评估。蛋白水平可采用免疫组织化学（IHC）定位并半定量检测组织中的蛋白表达，以Western blot进行精确定量，以ELISA检测血清、腹腔液等体液中的可溶性炎症因子；基因水平则采用实时荧光定量PCR（qPCR）检测组织中的mRNA表达水平。EMs模型通常表现为抗凋亡（如Bcl-2↑）、促血管生成（如VEGF↑）及促炎（如COX-2↑、IL-6↑）相关标志物的显著上调。

图一：子宫内膜异位病灶组织大体图展示

• 广泛的应用场景

凭借其与人类疾病的高度相似性，EMs大鼠模型在多个研究领域发挥着关键作用。

• 疾病机制研究

可用于探究EMs的病因、发生与发展机制，深入解析Wnt/β-catenin、EGFR/PI3K/AKT、HMGB1/TLR4/MyD88、NLRP3炎症小体等信号通路在疾病中的作用；还可专门用于EMs相关疼痛（如痛经、慢性盆腔痛）及盆腔粘连的形成机制与防治策略研究。。

• 药物研发与疗效评价

广泛用于评价各类新型化合物、中药复方及激素类药物（如地诺孕素、醋酸甲羟孕酮）的治疗效果；验证针灸、干细胞移植等干预措施的有效性与安全性；并为基因治疗、光动力疗法等前沿技术提供临床前验证平台。

（三）疾病并发症与证型研究

可建立EMs相关疼痛模型、EMs盆腔粘连模型等并发症研究模型；还可通过叠加“冰水浸泡”等刺激建立寒凝血瘀型EMs模型，或通过“子宫角返折法”建立卵巢型EMs模型，满足中医证型及特殊分型的实验需求。

六．结语

子宫内膜异位症大鼠模型作为该领域基础研究与临床前评价的核心工具，其科学价值已在疾病机制解析、药物筛选及新型疗法验证等方向得到充分验证。然而，模型构建成功只是研究的起点——从异位病灶的精准取材与病理鉴定，到炎症因子、血管生成等相关靶点的精确定量，每一个环节都关乎研究成果的可靠性与可转化性。

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