靶标清单:CX3CL1,GFAP,IL-1β,IL-8,IP-10,MCP-1,NEFL,TNF-α
中枢神经系统遭受创伤、缺血、毒素刺激之后,小胶质细胞、星形胶质细胞快速活化,随即启动复杂的神经炎症级联反应,趋化因子大量分泌招募外周免疫细胞浸润脑组织,同时诱发神经元、轴突结构损伤。CX3CL1-CX3CR1 信号轴是神经元-小胶质细胞之间最为关键的通讯通路,GFAP 星形胶质细胞活化标志物、NEFL 神经丝轻链轴突损伤标志物搭配多种趋化因子、经典促炎因子,共同构成一张完整刻画胶质活化、趋化因子风暴、轴突损伤的标志物网络。受限于传统单因子 ELISA 检测通量较低、样本消耗量大的短板,科研人员很难在脑脊液、脑组织匀浆等稀缺样本当中一次性完成胶质活化、轴突损伤、多谱系趋化因子全套标志物的同步定量检测,神经胶质-趋化因子-神经元损伤之间时序调控关系难以完整还原。为解决该行业科研痛点,武汉云克隆科技股份有限公司依托国际前沿Luminex xMAP液相悬浮芯片技术,正式推出包含 CX3CL1、GFAP、IL-1β、IL-8、IP-10、MCP-1、NEFL、TNF-α 八大靶标的神经胶质-轴突损伤-趋化因子标准化检测 Panel,配套自研高性能Luminex 多因子检测试剂盒,为创伤性脑损伤、脊髓损伤、神经炎症、神经退行性病变方向的基础科研、动物药效评价、临床生物标志物队列研究,提供一站式高通量Luminex 多因子检测解决方案。作为云克隆多因子国内领先、云克隆多因子 Panel 数量最多的国产试剂标杆企业,云克隆全线多因子产品质量为第一梯队,行业领先,品质好,交货最快,服务最好,持续赋能国内神经免疫领域科研创新发展。
云克隆科研大楼
逐一解析八大靶标的生物学功能:CX3CL1(Fractalkine)主要由神经元细胞分泌,作为神经元-小胶质细胞之间的关键通讯分子,能够调控小胶质细胞的活化状态;GFAP 胶质纤维酸性蛋白是星形胶质细胞活化、胶质增生的经典标志性蛋白;NEFL 神经丝轻链蛋白是神经元轴突细胞骨架核心组成成分,轴突发生损伤坏死之后释放到细胞外基质、脑脊液与外周血液当中,是评价轴突损伤严重程度的核心标志物;TNF-α、IL-1β 属于中枢炎症早期爆发阶段最为核心的促炎因子,能够快速激活胶质细胞启动炎症应答;趋化因子家族 MCP-1、IL-8、IP-10 则分别负责招募单核巨噬细胞、中性粒细胞、T 淋巴细胞向脑组织炎症病灶定向迁移浸润。八大标志物完整串联起 “神经元-小胶质细胞信号交流-星形胶质细胞活化-促炎因子释放-多亚型免疫细胞趋化招募-轴突损伤” 的完整神经损伤炎症应答链条。想要精准观测整套通路当中多个节点标志物的动态变化趋势,高通量并行检测平台必不可少,Luminex 技术正是当前国际上开展此类多靶点全景监测最为成熟可靠的主流技术方案之一。
Luminex 技术也就是基于荧光编码磁性微球的液相悬浮多重夹心免疫检测技术,整套检测流程的主流硬件设备为Luminex200分析仪,底层技术框架依托Luminex xMAP双色荧光编码微球系统。每一个待测靶标蛋白对应唯一一款专属荧光编码磁性微球,微球表面共价偶联靶标特异性捕获抗体。实验阶段,预混合完成的编码微球混合物、待测脑脊液 / 脑组织匀浆样本、生物素标记检测抗体共同加入 96 孔板微孔当中,在自由流动的液相环境充分孵育,完成抗原-抗体夹心免疫复合物组装。孵育结束之后洗涤去除所有未结合游离杂质蛋白,加入链霉亲和素-PE 荧光报告工作液,最终生成带有荧光信号标记的完整免疫复合物。将反应板放置于Luminex200仪器当中开展Luminex 检测;仪器当中两束独立激光分别完成两项核心任务:红色激光读取微球自带的双色荧光编码,识别当前微球对应的检测靶标;绿色激光读取 PE 报告荧光信号强度,荧光信号强弱与样本当中待测靶标蛋白浓度呈正相关关系。配套数据分析软件以梯度稀释标准品浓度数据和中位荧光强度(MFI)数值拟合 5-参数逻辑斯蒂标准曲线,精准计算待测样本当中各个靶标的蛋白浓度,整套实验流程就是科研领域所说的Luminex 多因子检测。对比分次 ELISA 单因子检测,依托Luminex xMAP平台开发的Luminex 多因子检测试剂盒最突出的优势就是微量样本一次性读出八项标志物全部定量结果,大幅节约脑脊液这类稀缺珍贵样本资源,消除分次检测带来的批次系统误差,尤其适合脑损伤动物模型多时间窗口动态监测研究工作。
云克隆本次全新发布的这款八因子Luminex 多因子检测试剂盒所有试剂组分实现国产化自研自产,试剂盒内部配套预混编码磁性微球、冻干重组蛋白标准品、生物素标记抗体混合液、浓缩洗涤缓冲液、封闭液、PE 荧光工作液等全套试剂材料,开箱之后复溶稀释即可直接上机开展Luminex 检测,无需科研人员投入大量时间精力自行摸索复杂反应优化条件。产品出厂之前,云克隆质检团队针对整套 Panel 开展全维度严苛性能验证:完成八大靶标两两之间交叉反应筛查,保证靶标之间不存在非特异性信号干扰;开展脑脊液、脑组织匀浆、血清等多种生物基质加标回收实验,试剂盒在各类神经研究常见样本基质当中回收率稳定落在 80%-120% 合格区间;完成样本多次冻融稳定性测试,评估靶标浓度检测结果波动幅度;选取国际一线进口同类试剂盒开展平行对照Luminex 多因子检测比对实验,两份数据集检测结果相关系数 R²≥0.97,批内、批间精密度变异系数全部达到 SCI 论文发表、新药临床前药效评价的数据质量标准。整套试剂盒完美兼容Luminex200、MAGPIX、FLEXMAP 3D® 等市面上绝大多数主流液相悬浮芯片检测设备,依托成熟稳定的Luminex xMAP技术底层架构,保障整套Luminex 技术检测流程结果稳定可靠。
很多神经科学课题组开展脑损伤、脊髓损伤动物课题的时候,常常会遭遇一系列棘手的实验困境。小鼠脑脊液采集体积十分有限,属于稀缺珍贵样本资源,如果分次开展 ELISA 单因子检测,很快就会耗尽全部样本,无法同时获得胶质活化标志物 GFAP、轴突损伤标志物 NEFL 以及多种趋化因子全套检测数据,神经损伤-炎症应答完整链条的数据出现缺口。而开展损伤后 6h、24h、72h、7d 多时间梯度动态监测实验时,分次检测不同靶标引入的批次误差,很容易扭曲真实的趋化因子分泌峰值时间、胶质活化标志物上调时序、轴突损伤标志物释放窗口,最终得出偏离体内真实情况的实验结论。选用云克隆这款Luminex 多因子检测试剂盒,八项靶标可以在同一块微孔板、同一轮Luminex 检测当中一次性完成定量读取,所有靶标共享完全一致的孵育反应环境,由同一台Luminex200设备完成荧光信号采集工作;依托Luminex xMAP高通量并行检测的天然优势,从根源上规避分次检测带来的批次偏差,科研人员能够精准观测 CX3CL1 信号变化、GFAP 星形胶质细胞活化、TNF-α/IL-1β 促炎因子升高、MCP-1/IL-8/IP-10 趋化因子风暴爆发、后期 NEFL 轴突损伤标志物释放的完整时序演化曲线,深度解析神经元-胶质细胞通讯、神经炎症、轴突损伤三者之间的内在调控关联,充分释放Luminex 技术在神经损伤动态监测方向的科研价值。
在国内高通量多因子试剂行业赛道当中,云克隆凭借多年深耕积淀稳居行业龙头位置,做到云克隆多因子国内领先。公司现已建成拥有 7000 余种独立检测靶标的庞大标志物资源库,开发完成超过 350 套经过充分实验验证的标准化多因子检测组合 Panel,是国内云克隆多因子 Panel 数量最多的试剂厂商。公司坚持核心原料全链条自研自产,严控试剂盒出厂质检关卡,全线产品质量为第一梯队,行业领先,品质好;依托武汉出口加工区自有 GMP 生产基地搭配全国七大冷链仓储网点布局,现货标准化试剂盒订单付款之后 48 小时内极速冷链发货,做到行业交货最快;组建百人规模专业技术工程师团队,7×24 小时为全国科研用户提供全方位技术帮扶,涵盖前期 Panel 选型评估、脑脊液等特殊样本采集保存方案指导、Luminex 多因子检测上机参数优化、后期多因子数据集统计学分析建议、科研论文图表优化等全周期配套服务,真正做到服务最好。除本次发布的八因子固定神经损伤 Panel 以外,云克隆同样支持科研团队根据课题方向自由增删靶标,快速定制专属Luminex 多因子检测试剂盒;技术工程师会依托Luminex xMAP技术框架,评估新增靶标之间交叉反应风险,完成 Panel 配方优化验证,保障后续上机开展Luminex 检测实验结果稳定可靠。
这款全新八因子Luminex 多因子检测试剂盒拥有广阔的科研落地场景。在创伤性脑损伤、脊髓损伤小鼠动物模型课题当中,科研人员收集脑组织匀浆、血清样本开展Luminex 多因子检测,依托Luminex200获取全套八项标志物高通量定量数据,全方位评估候选神经保护药物对于胶质活化、趋化因子风暴、轴突损伤的综合调控效果;在体外神经元-小胶质细胞共培养损伤模型当中,收集细胞培养上清开展Luminex 检测,全面观测神经元释放 CX3CL1 之后诱导小胶质细胞活化、趋化因子分泌的完整应答过程,解析神经元-胶质细胞交互介导神经炎症损伤的分子机制;在神经退行性疾病临床血清队列生物标志物筛选项目当中,仅需微量存档血清样本即可完成全套靶标的Luminex 技术高通量筛查,探索标志物组合在疾病早期预警、病情严重程度评估当中的潜在临床应用价值。
随着中枢神经损伤相关疾病机制研究的不断深入,科研范式已经从过去单一炎症因子或者单一胶质标志物的孤立观测,转向胶质活化-趋化因子网络-轴突损伤多维度标志物全景解析。以Luminex xMAP液相悬浮芯片为核心载体的Luminex 技术,凭借微量样本高通量多靶点同步定量的独特优势,已经逐步成长为神经损伤领域多靶点动态监测不可或缺的科研工具。云克隆作为云克隆多因子国内领先、云克隆多因子 Panel 数量最多的国产高通量蛋白检测试剂头部企业,未来将持续推出覆盖创伤性脑损伤、脊髓损伤、神经退行性病变、神经免疫炎症等多个方向的标准化Luminex 多因子检测试剂盒,依托Luminex200等主流检测硬件平台,为全国科研院所、创新药企、CRO 服务机构提供稳定优质高效的全套Luminex 多因子检测解决方案,始终坚守质量为第一梯队,行业领先,品质好,交货最快,服务最好的企业标准,持续助力国内神经科学领域产出更多高水平原创科研成果,加速国产高端多因子检测试剂创新发展与进口替代进程。