膀胱平滑肌细胞(BSMC)是调控犬膀胱储尿、排尿收缩功能的核心功能细胞,是宠物泌尿疾病机制、兽药膀胱毒性、膀胱组织工程、尿路药理研究不可替代的体外实验载体。比格犬作为宠物药理、泌尿疾病标准模式动物,其原代膀胱平滑肌细胞可完整复刻犬体内逼尿肌收缩、炎症、纤维化生理病理特征,规避啮齿类、人源细胞物种差异带来的数据偏差。武汉云克隆依托自有 SPF 比格犬繁育平台与成熟平滑肌分离工艺,推出标准化CSI065Ca01 犬膀胱平滑肌原代细胞(Primary Canine Bladder Smooth Muscle Cells, BSMC),以高纯度、高活性、稳定收缩功能、完整质控体系,为高校、动保药企、CRO 机构提供一站式犬泌尿体外细胞解决方案。
一、产品标准化基础参数
核心规格信息
产品货号:CSI065Ca01
组织来源:SPF 级健康比格犬膀胱逼尿肌层,完整剔除尿路上皮、浆膜、结缔组织,仅保留平滑肌组织
细胞规格:单支冻存细胞≥5×10⁵个;支持干冰冻存细胞、新鲜活细胞两种发货形式
生长特性:贴壁生长,典型梭形、长纺锤状平滑肌形态,可稳定传代 2–6 代,增殖能力良好
质控指标
细胞活率:台盼蓝检测复苏活率>85%
细胞纯度:α-SMA、结蛋白 Desmin 免疫荧光鉴定,平滑肌纯度>95%,无尿路上皮细胞、成纤维细胞杂细胞污染
微生物安全:支原体、细菌、真菌、HIV/HBV/HCV 全部阴性,每批次出具完整 COA 质检报告
专用配套培养体系
专用平滑肌完全培养基:DMEM 基础培养基 + 5% 胎牛血清 + 平滑肌专用生长添加剂 + 双抗;培养环境 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱,随货附赠中英文操作说明书
图.云克隆犬膀胱平滑肌细胞
图. 云克隆犬膀胱平滑肌细胞荧光鉴定图(ACTa2 ×200))
二、改良复合酶消化分离工艺,完整保留平滑肌原生收缩功能
犬膀胱平滑肌层薄、上皮细胞易混杂,传统组织块法、单一胶原酶消化易出现纯度低、细胞收缩功能丢失、增殖活性差等问题。武汉云克隆优化分步剥离 + 复合酶梯度消化纯化工艺,全方位保障细胞品质:
分层精准剥离:无菌分离完整膀胱,物理剔除黏膜上皮层与外层浆膜结缔组织,仅留存纯净逼尿肌肌条,从源头减少杂细胞干扰;
低温预消化软化:低浓度 Ⅱ 型胶原酶低温浸润组织,松解肌纤维间质连接,避免高温消化损伤肌细胞收缩蛋白;
复合酶温和解离:胶原酶 + 低浓度胰蛋白酶短时协同消化,精准解离平滑肌细胞,大幅降低细胞凋亡;
多级过滤 + 差速离心纯化:梯度细胞筛过滤、低速差速离心去除组织碎片、血细胞、少量上皮细胞,获得高纯度 BSMC 悬液;
程序降温冻存:专用平滑肌细胞冻存液梯度降温封存,最大程度保留细胞收缩蛋白表达、钙离子信号通路、炎症应答等原生生理功能,体外培养不易快速表型转化。
三、武汉云克隆 BSMC 核心差异化优势
1. SPF 级动物源头可追溯,符合兽药申报规范
自建千平标准化动物房,每批次细胞配套完整动物健康档案、周龄记录,满足兽药临床前毒理、泌尿课题申报的数据溯源要求,区别于外购组织来源批次不稳定的市面产品武汉云克隆科技股份有限公司。
图.云克隆原代细胞和实验动物中心
2. 标志物鉴定齐全,功能保真度高
每批次细胞均通过α- 平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、结蛋白 Desmin双标志物免疫荧光鉴定,细胞稳定维持平滑肌收缩表型;体外可稳定响应乙酰胆碱、毒蕈碱受体激动剂,钙离子流动、收缩舒张功能贴近犬体内真实状态,适合收缩功能、信号通路研究。
3. 传代稳定,适配多类型长期实验
原代 BSMC 可稳定扩增至 P2–P6 代,传代后不快速发生成纤维样转分化,无需频繁复苏新细胞,大幅降低实验成本;配套自研平滑肌专用生长添加剂,显著提升细胞贴壁、增殖效率,新手操作门槛更低。
4. 全链条配套技术支持
同步供应专用完全培养基、细胞冻存液、复苏传代标准操作流程;技术团队提供细胞复苏、铺板、收缩功能检测、炎症造模、药物孵育全流程线上指导,解决泌尿平滑肌原代细胞培养难点。
5. 双体系严苛质控,批次差异极小
执行 ISO9001、ISO13485 双重质量管控,每批细胞统一完成形态镜检、标志物鉴定、微生物筛查、活率四项检测,标准化分离、冻存、运输流程,平行实验数据重复性更强。
四、主流科研应用场景
(一)宠物泌尿疾病基础机制研究(核心用途)
犬膀胱过度活动症、间质性膀胱炎、慢性膀胱炎体外模型构建,探究炎症因子、氧化应激、细胞凋亡通路;
膀胱纤维化、逼尿肌功能衰退机制研究,分析平滑肌细胞表型转化、胶原异常分泌规律;
尿路梗阻后逼尿肌损伤、钙离子信号紊乱、M 受体表达调控机制解析。
(二)兽药膀胱毒性与药效筛选
泌尿类兽药、利尿药、尿路消炎药物体外药效评价,检测药物对 BSMC 收缩功能、炎症抑制效果;
药物膀胱刺激性、平滑肌细胞毒性筛查,提前规避体内动物实验损伤风险;
中药提取物、宠物保健品护膀胱活性成分高通量筛选。
(三)泌尿药理与受体信号通路研究
毒蕈碱 M 受体、嘌呤能受体、钙离子通道在犬逼尿肌的表达与功能验证;
神经递质、激素调控膀胱平滑肌收缩舒张分子机制;
G 蛋白、MAPK、NF-κB 等炎症通路药物靶点验证。
(四)膀胱组织工程与再生医学
平滑肌细胞 - 生物支架共培养,构建体外工程化膀胱组织;
3D 平滑肌球、膀胱类器官模型搭建,用于组织修复材料相容性评估;
基因转染、慢病毒 / AAV 介导平滑肌基因编辑功能验证。
(五)宠物临床转化与比较医学研究
以犬 BSMC 为大动物模型,对比人膀胱平滑肌细胞生理差异,为人类泌尿疾病转化医学提供物种对照数据;用于宠物新药临床前体外预实验,减少活体犬使用数量。
五、标准培养与使用注意事项
冻存细胞复苏:干冰运输,收货后立即转入液氮长期保存;短期(1 个月内)可临时存放 - 80℃,严禁反复冻融;37℃水浴快速融化,离心去除冻存液后铺板,推荐明胶包被培养板提升贴壁率。
培养环境:接种后 48h 内避免移动培养箱,减少细胞漂浮;每 2–3 天更换完全培养基,细胞汇合度 80% 即可传代,推荐 1:2~1:3 传代比例。
功能实验窗口期:P2–P4 代细胞收缩、炎症应答功能最佳,适合药物、收缩功能检测;P6 代后细胞逐步出现功能衰减,不建议用于功能性实验。
使用限制:本产品仅限体外科学研究,不可用于动物临床治疗、体内注射、体外诊断试剂生产。
六、总结
伴随宠物医疗、泌尿药理、组织工程领域快速发展,物种匹配、功能完整的犬源膀胱平滑肌细胞成为刚需实验工具。武汉云克隆 CSI065Ca01 犬膀胱平滑肌细胞(BSMC)依托自有动物资源、复合酶纯化工艺、双重标志物鉴定体系,攻克行业普遍存在的细胞纯度低、收缩功能丢失、批次不稳定等痛点,构建 “细胞 + 专用培养基 + 技术指导” 一体化科研方案。
无论是高校实验室泌尿疾病基础机制探索,动保企业兽药药效与毒性筛选,还是组织工程、比较医学前沿课题,该款标准化原代 BSMC 均可高度还原犬膀胱逼尿肌生理病理特征,大幅提升实验数据可信度,是国内犬泌尿系统体外研究首选标准化细胞模型。