技术分享|坐骨神经损伤(SNI)大鼠模型构建方案
2026/6/24 9:19:57 网站建设 项目流程

外周神经损伤是临床骨科、神经外科高发病症,多由外伤、手术创伤、局部压迫、机械损伤等因素引发,其中坐骨神经损伤最为常见。坐骨神经损伤后易诱发持续性神经病理性疼痛、肢体运动功能障碍、感觉减退、神经脱髓鞘及细胞凋亡等一系列病理改变,且临床修复难度大、预后效果差,极易遗留长期后遗症,是目前神经医学领域的研究重难点。

受制于人体实验的伦理限制,坐骨神经损伤(SNI)大鼠模型成为替代临床样本、开展外周神经损伤机制研究的核心工具。该模型可精准复刻人类坐骨神经机械性损伤后的病理演变全过程,包括神经水肿、髓鞘损伤、神经元凋亡、自噬异常及慢性痛敏反应等,模型表型稳定、个体差异小,能够完美适配神经损伤机制探究、神经保护药物筛选、抗炎镇痛药效评价、神经再生修复技术验证等各类科研场景,是神经科学、药理学、再生医学领域高分课题的首选动物模型之一。

目前国内多数实验室自主造模存在手术操作不标准、损伤程度不均、假手术对照不规范、取材处理混乱等问题,极易导致实验数据重复性差、结果偏差大。基于此,武汉云克隆搭建了标准化SNI大鼠模型构建平台,统一手术流程、损伤标准、饲养周期与检测体系,为科研人员提供高稳定、高复刻的标准化动物模型服务。

SNI大鼠模型基础信息

模型名称:坐骨神经损伤(SNI)大鼠模型

英文名称:Rat Model for Sciatic Nerve Injury (SNI)

产品编号:DSI838Ra01

原型物种

来源夹闭坐骨神经干导致坐骨神经损伤

模式动物品系SPF 级SD大鼠,雄性,8 周

实验分组随机分组:对照组,模型组,阳性药物组,受试药物组(三个剂量梯度组),15只每组

实验周期4 weeks

建模方法

对雄性大鼠行腹腔注射麻醉。将大鼠俯卧位固定于鼠固定架上,铺孔巾,暴露鼠左下肢并剪掉鼠毛。碘酒、酒精消毒三遍,于左侧股后正中行纵行、长约6-8mm切口,暴露皮下肌肉。用止血钳钝性分离股二头肌、半腱肌、半膜肌后,分离出白色、粗大的坐骨神经,刺激后左足出现抽动。距坐骨结节6-8mm处(定位);用大止血钳夹闭坐骨神经干,压满3扣;挤压5秒钟后松开止血钳,间隔10秒后再夹闭5秒钟,再放松10秒,第三次再夹闭5秒(定时)。神经干挤压伤宽度约3mm。9-0无创缝线标记后,将坐骨神经送回原位,整理肌肉,缝合创口;假手术组大鼠麻醉后,仅切开皮肤暴露左侧坐骨神经但不做钳夹,在相应部位相同方法标记后缝合。

后期取材

将取出的动物饲养一周,结束后,注射水合氯醛麻醉大鼠,将鼠仰卧位固定于大鼠固定架上。自颌下至小腹行胸、复联合切口,切断肋骨,剪断膈肌,暴露出跳动的心脏。用16号针头由左心尖刺入左心室,用软静脉留置导管沿左心室经主动脉瓣插入主动脉,剪开右心耳。先用0.9%生理盐水250ml快速冲洗组织内血液,其后用4%多聚甲醛固定液快速推注100ml,再缓慢推注100ml,直至使鼠尾巴翘起,身体逐渐僵硬,颜色变白为止。灌注后,立即将身体一僵硬的鼠于俯卧位固定于手术台上,由胸-骶部沿脊柱正中切开,暴露及分离背部肌肉,沿十二肋肌部切断T12 L1水平脊柱、脊髓。沿坐骨神经走行切腰4、腰5、骶1段脊髓和包括挤压伤在内的上下各2mm的坐骨神经。同法切取假手术组的相应部位等长标本。分三种方法进行处理及固定。(1) 4%多聚甲醛固定液中固定,制备石蜡切片。(2) 2.5%戊二醛液固定后,备做电镜。(3)液氮中冷冻,备做冰冻切片。

组织病理学

Figure. HE staining of rat sciatic nerve tissue. A: control group, B: SNI group

1、大鼠坐骨组织病理检查

坐骨神经组织在4%多聚甲醛中固定24 小时后,包埋成石蜡块。石蜡块放在-20℃冰箱中冰一下,在切片机上进行切片,切片厚度4um,置于水槽中展开、捞片和贴片。石蜡切片切好后需要烤片,60℃烤片2 小时。进行Loyez苏木精染色,光镜下观察再生髓鞘的情况。

2、 TUNEL检测坐骨神经组织凋亡情况

坐骨神经组织切片脱蜡,蛋白酶K室温下消化,TDT酶反应液37℃孵育 1 h,0.3%H2O2抑制内源性过氧化物酶,Streptavidin-HRP 室温5min,DAB 显色,苏木精复染。阴性对照采用无酶标记液(去除TDT)代替TDT酶反应液。凋亡细胞核呈棕褐色颗粒,光镜下观察并计数凋亡细胞。

3、电镜观察自噬情况

坐骨神经组织2.5%戊二醛液固定,制备电镜样品,利用电镜在超微结构水平观察坐骨神经组织中自噬情况。

应用场景

该标准化SNI大鼠模型造模损伤均一、表型稳定、重复性强,可全方位适配各类神经科学研究:

外周神经损伤病理机制、神经炎症、髓鞘损伤修复研究;

神经病理性疼痛发生机制、痛敏调控及镇痛药物筛选;

神经元凋亡、自噬、氧化应激相关分子机制研究;

中药、化药、生物制剂的神经保护、抗炎、促再生药效评价;

神经再生材料、康复干预手段的效果验证。

云克隆标准化动物模型服务优势

动物模型的稳定性,是科研数据可信、论文结果可重复的核心前提。自主造模常存在手术手法差异、损伤程度不均、分组不标准、取材不规范等问题,极易导致实验数据离散度大、实验返工、论文返修。

武汉云克隆深耕模式动物服务多年,拥有SPF级标准化动物实验室、专业手术操作团队与全流程质控体系,可提供坐骨神经损伤(SNI)大鼠模型一站式造模、饲养、取材、病理检测服务:

1、标准化造模体系:统一手术切口、夹闭力度、损伤时长、定位标准,规避人为误差,模型成模率高、表型稳定,数据重复性极强;

2、全流程闭环服务:可提供动物造模、SPF级饲养、梯度给药干预、标本灌注取材、石蜡/冰冻切片、染色检测、数据分析全套服务,一站式解决科研需求;

3、多维度检测配套:可配套病理染色、TUNEL凋亡、电镜检测、免疫组化、qPCR、WB等各类分子实验,无缝衔接机制研究与药效评价;

4、合规可溯源:所有实验流程标准化、数据全程存档,符合高校、药企、三甲医院科研合规要求,适配SCI论文发表、课题结题、新药申报等各类场景。

除SNI坐骨神经损伤模型外,云克隆可提供各类神经损伤、疼痛、炎症、肿瘤、代谢类标准化动物模型,同时配套全系ELISA试剂盒、多因子检测、原代细胞等科研试剂,实现动物模型+组织检测+分子验证一站式科研解决方案,高效助力科研成果产出!


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