Circumsporozoite (CS) Protein Repetitive Sequences
2026/6/17 2:32:15
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项目流程
一、基础信息
- 中文名称:疟原虫环子孢子蛋白重复序列肽
- 英文名称:Circumsporozoite (CS) Protein Repetitive Sequences
- 完整三字母序列:Asn-Pro-Asn-Ala-Asn-Pro-Asn-Ala-Asn-Pro-Asn-Ala-Asn-Pro-Asn-Ala-Asn-Pro-Asn-Ala-Asn-Pro-Asn-Ala
- 单字母全长序列:NPNA NPNA NPNA NPNA NPNA NPNA
- 氨基酸总数:24 aa
- 分子式:C96H146N36O37
- 分子量:2396.44
- 结构修饰:线性多肽,游离 N 端氨基、游离 C 端羧基;无乙酰、酰胺、二硫键、环化、特殊修饰残基。
- 结构式:
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二、理化性质
- 紫外定量:无 Tyr、Phe、Trp、Met,280 nm 无紫外吸收,需 BCA、Lowry、氨基酸分析法、茚三酮定量。
- 稳定性:无易氧化残基、无光敏残基,常规避光即可;序列大量 Pro 形成多处刚性 β 转角,抗普通蛋白酶水解能力优于普通柔性多肽;无 Cys 不存在氧化聚合问题。
- 酸碱特性:仅含中性亲水残基 Asn、Ala、Pro,整体近电中性;pH 6.5–7.6 PBS、免疫缓冲液、细胞培养液中稳定性佳。
- 溶解性:高比例 Asn 亲水残基,水溶性极好,纯水、中性缓冲液常温快速溶解。
- 空间构象:NPNA 重复单元形成规则刚性转角阵列,高度模拟疟原虫 CS 蛋白表面免疫优势重复表位天然构象。
三、来源背景
NPNA 是恶性疟原虫环子孢子蛋白(CS 蛋白)最核心的串联重复抗原区,为疟疾疫苗研究标志性表位;6 次重复是实验室最常用的多拷贝重复肽,免疫原性远高于单拷贝 NPNA,广泛用于疟疾免疫、疫苗、抗体筛选实验。
四、生物学功能
- 强免疫原性 B 细胞优势表位,刺激机体产生高滴度抗疟原虫特异性抗体,是宿主中和子孢子、阻断肝细胞入侵的关键靶标。
- 模拟天然 CS 蛋白重复区,介导疟原虫子孢子与肝细胞受体识别结合。
- 多拷贝串联重复大幅提升抗原提呈效率,增强体液免疫应答。
五、科研应用
- 疟疾疫苗研发:多表位疫苗构建、免疫原性评价、中和抗体效力检测。
- 抗体制备:免疫动物制备 CS 蛋白特异性多抗 / 单抗,用于疟原虫检测。
- 体外诊断试剂:作为标准抗原开发 ELISA、免疫层析疟疾检测试剂盒。
- 寄生虫免疫机制:研究抗体中和、T 细胞应答、宿主抗疟保护机制。
六、溶解与储存规范
- 溶解:pH7.2 无菌 PBS 或超纯水室温溶解,无特殊避光、隔氧要求。
- 冻干粉:短期 - 20 ℃密封保存;长期分装后 - 80 ℃储存。
- 工作液:单次分装避免反复冻融;2~8 ℃避光可稳定存放 7–10 天。